什么是制備型 HPLC？

更新時間：2025-01-13

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制備型HPLC是可以分離和收集組分的高效液相色譜（ HPLC ）。

通過對主要成分進行精制可以提高純度，并且可以收集樣品中所含的雜質(zhì)等微量成分。制備型HPLC的原理與普通HPLC分析相同，因此通過選擇合適的色譜柱，可以根據(jù)化合物的各種特征，如化學結(jié)構(gòu)、分子量和3D結(jié)構(gòu)來分離和純化各個組分。

此外，通過改變色譜柱尺寸和設備配置，制備型 HPLC 可以將獲得的目標產(chǎn)物的量從毫克級改變到公斤級。

制備型 HPLC 的應用

1.化學合成后目標成分的純化

制備型HPLC的一個特點是它可以利用HPLC的高分離能力。如果您可以在 HPLC 上獲得分離的峰，則可以單獨分離每個峰。

在有機化學、生物化學等領(lǐng)域，通過化學合成或生物催化劑合成獲得的樣品除主要成分外，還含有雜質(zhì)、副產(chǎn)物等多種微量成分。使用柱純化和重結(jié)晶等常規(guī)純化方法很難選擇性地僅提取一種成分。另一方面，對于制備型HPLC，如果可以進行HPLC分離，則分離的可能性很高。

2. 通過主成分和雜質(zhì)的制備分離進行副反應分析

在制備型HPLC中，通過HPLC分離的每個峰都可以作為單獨的級分收集，因此可以選擇性地收集高純度的主要成分和雜質(zhì)。例如，在材料行業(yè)中，高純度樣品用于利用制備型HPLC獲得的高純度目標物質(zhì)來評估材料和物理性質(zhì)。

此外，在化學工業(yè)中，通過高純度雜質(zhì)和副產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)分析來分析反應系統(tǒng)中發(fā)生的副反應。

3. 蛋白質(zhì)和聚合物的純化

在生物系統(tǒng)中，制備型 HPLC 通過尺寸排阻色譜 (SEC) 柱進行蛋白質(zhì)純化。在聚合物領(lǐng)域，我們使用SEC柱來純化聚合物，進行分子量分級，并評估各組分的物理性能。

4.天然產(chǎn)物的純化

HPLC 的高分離能力有時用于從含有各種化合物的天然產(chǎn)物樣品中提取目標物質(zhì)。反相柱因其高分離能力而經(jīng)常被使用。

制備型高效液相色譜法原理

制備型 HPLC 的分離機理與分析型 HPLC 類似。與常規(guī)柱純化和重結(jié)晶等其他純化方法不同，制備型 HPLC 的優(yōu)勢在于它可以以與分析幾乎相同的分離能力進行純化。

HPLC柱填充有多孔硅膠或表面經(jīng)過烷基等官能團修飾的硅膠。填充的材料稱為固定相，常用的是十八烷基（ODS，C18）基團修飾的硅膠。當樣品溶液注入柱中時，樣品的每種成分與固定相相互作用或分配到固定相中。

這種相互作用的強度或分配程度取決于每種組分的物理化學性質(zhì)，因此每種組分在通過色譜柱時會分離。 HPLC的原理就是通過這種方式分離各個組分。

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